免疫技术与传染病杂志

使用蛋白 A、蛋白 G 和蛋白 A/G 荧光微球免疫分析检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒 2 型抗体

Mohammad M Hossain 和 Raymond RR Rowland

本研究的目的是开发多重荧光微球免疫测定法 (FMIA)，通过掺入非物种特异性结合物蛋白 A、G 和 A/G 代替二抗，检测猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 和猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 特异性 IgG 抗体。共测试了 205 个从实验感染 PRRSV 和/或 PCV2 的猪中获得的血清样本。为了生产重组抗原，PRRSV 核蛋白 (N) 和 PCV2 衣壳蛋白 (CP) 在大肠杆菌中表达并在镍亲和柱上纯化。纯化的蛋白质与羧化微球珠共价偶联。将四种靶抗原组装成单个多重抗原，并针对感染或同时感染 PRRSV 或 PCV2 的猪血清进行测试。已经测试了蛋白 A、G 和 A/G 代替二抗结合物猪 IgG。所有结合物均能检测抗体，并且针对 PRRSV 和 PCV2 抗原靶标的 IgG 反应的检测随 A> A/G> G 而变化。在缺乏物种特异性试剂的情况下，蛋白质 A、G 和 A/G 的加入可提供合适的替代品。