免疫技术与传染病杂志

犬麻疹病毒横向流动检测法的优化及试纸条作为样品替代品的应用

Monu Karki*、KK Rajak、Praveen Singh、Arfa Fayaz、Kiran、Mukesh Bhatt、Vishal Rai、Chris Einstein、Ajay Kumar Yadav 和 RP Singh

犬瘟热是一种新出现的疾病，由副粘病毒科的犬瘟热病毒 (CDV) 引起。由于该病毒影响许多野生动物物种，因此已发展成为一种多宿主病原体。开发特异性和灵敏性的诊断测试是控制计划的必要条件。有几种诊断测试可用于检测 CDV 抗原和抗体。横向流动分析 (LFA) 是最有前途的即时诊断测试，因为它具有特异性、易于使用和即时结果。本研究旨在开发一种横向流动分析，使用内部开发的单克隆抗体 (mAb) 来对抗“CDV/dog/bly/Ind/2018”分离株的核衣壳蛋白 (N)，该分离株代表印度的流行菌株。研究中包括的两种 mAb 在间接 ELISA 和斑点印迹分析中表现出高结合亲和力。在这两种 mAb 中，选择了一种 mAb，因为它在 LFA 格式中的结合亲和力相对较高，并且与生物基质和缓冲液成分的非特异性结合较少。现场采集的新鲜临床样本用 LFA 检测结果清晰，而病毒滴度降低的储存样本结果不一致。此外，血液样本的阳性和阴性区别比拭子和组织匀浆更明显。通过对 Trizol RNA 提取方法进行一些改进，试纸成功提取了 RNA，并扩增了 N 和 H 基因片段。因此，研究得出结论，LFA 适用于现场条件下的 CDV 抗原检测，试纸可作为分子研究的样本替代品。