药剂学与药物输送研究杂志

氟达拉滨-（C2-甲基羟基磷酰胺）-[抗-IGF-1R]：合成及针对肺腺癌（A549）的选择性抗肿瘤细胞毒性

Coyne CP 和 Lakshmi Narayanan

氟达拉滨-（C2-甲基羟基磷酰胺）-[抗-IGF-1R]：合成及针对肺腺癌（A549）的选择性“靶向”抗肿瘤细胞毒性

简介：许多（如果不是大多数）常规小分子量化疗药物对多种肿瘤疾病具有很强的疗效。不幸的是，静脉注射后，大部分给药剂量会无意中被动扩散到正常组织和健康器官系统中。增加效力和减少剂量限制后遗症的一种策略是选择性“靶向”递送常规化疗药物。

材料和方法：氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-1R] 的合成方法是先将氟达拉滨与碳二亚胺反应，形成氟达拉滨碳二亚胺磷酸酯中间体，然后与咪唑反应，生成胺反应性氟达拉滨-(C2-磷酸咪唑) 中间体。单克隆抗-IGF-1R 免疫球蛋白与胺反应性氟达拉滨-(C2-磷酸咪唑) 中间体结合，合成共价氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-1R] 免疫化疗药物。通过连续微滤(MWCO 10,000)去除残留的氟达拉滨和未反应的试剂，并通过分析级 HP-TLC 进行监测。使用过表达 IGF-1R 和 EGFR 的肺腺癌细胞 (A549)，通过细胞 ELISA 确定氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-1R] 保留的 IGF-1R 结合亲和力。使用基于 MTT 的活力染色方法测定氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-1R] 对肺腺癌 (A549) 的抗肿瘤细胞毒性效力。

结果：氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-R1] 的氟达拉滨摩尔结合指数为 3.67:1，而非共价结合的氟达拉滨在连续微滤后通过分析级 HP-TLC 检测不到。通过 SDS-PAGE 和化学发光放射自显影对氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-1R] 进行尺寸分离，仅检测到单个 150 kDa 带。氟达拉滨-(C2-甲基羟基磷酰胺)-[抗-IGF-1R] 的细胞 ELISA 测量与肺腺癌 (A549) 外表面膜结合的总免疫球蛋白随着升高而增加