分子生物学与方法杂志

通过 qRT-PCR 比较使用胎盘 gDNA 和 mRNA 进行大鼠胎儿性别鉴定

安东尼·L·苏和丽塔·洛克-卡鲁索

人们越来越需要将胎儿性别视为一个生物变量，并准确评估性别特异性影响。在用于确定胎儿性别的多种方法中，除了使用转录组学和巴尔小体检测等方法外，还经常使用 Sry（性别决定区 Y）与基因组 DNA (gDNA) 的定量实时聚合酶链式反应 (qRT-PCR)。然而，SrygDNA 的产物 Sry 信使 RNA (mRNA) 此前尚未用于性别确定。本研究使用妊娠第 16 天 (GD) 的 Wistar 大鼠胎盘样本，评估了使用 gDNA 与 mRNA 检测 Sry 以确定胎儿性别的兼容性。本研究中使用的样本来自一项更大规模的研究，该研究调查了三氯乙烯 (TCE) 的生殖毒性以及 N-乙酰-L-半胱氨酸 (NAC) 和氨基氧乙酸 (AOAA) 的潜在调节。在 91 个样本中，有 90 个样本通过 gDNA 确定的性别分类与通过 mRNA 分析 Sry（Sry/B2m）值确定的性别分类相符。对于 gDNA 和 mRNA，在整体考虑样本和按治疗组分开样本时，观察到雄性和雌性之间的 Sry/B2m 值存在统计学上的显著差异（所有比较的 p<0.01 或以下，除两个比较外，所有比较的 p<0.001 或以下）。最后，还讨论了使用 SryCq 值确定胎儿性别和 B2m 参考基因的有效性。总之，这项研究表明，可以使用 gDNA 或 mRNA 中的 Sry 测量来确定 Wistar 大鼠的胎儿性别，结果高度兼容。